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    大鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽PⅠNPELISA試劑盒

    描述:大鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽PⅠNPELISA試劑盒操作簡單、結(jié)果精確,臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與發(fā)展,以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專業(yè)的技術(shù)服務(wù),贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認(rèn)可。我司也一直和國內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系,共同努力合作共贏。

    更新時間:2024-07-03
    產(chǎn)品型號:
    廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
    詳情介紹

    一、大鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽PⅠNPELISA試劑盒詳細(xì)介紹

    中文名稱:大鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽PⅠNPELISA試劑盒

    規(guī)格: 48T /96T

    品牌:臻科生物

    種屬:大鼠

    檢測波長:450 nm

    所需樣本體積: 50ul

    適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷。

    保存及有效期:2-8℃,六個月

    檢測樣本種類:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達(dá)。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

    臻科生物供應(yīng)的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、人、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等

    二、實驗原理

    本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽PⅠNP水平。用純化的大鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽PⅠNP抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入Ⅰ型前膠原氨基端原肽PⅠNP,再與HRP 標(biāo)記的Ⅰ型前膠原氨基端原肽PⅠNP抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Ⅰ型前膠原氨基端原肽PⅠNP呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽PⅠNP濃度。

    三、試劑盒組成

    1

    30 倍濃縮洗滌液

    20ml×1 瓶

    7

    終止液

    6ml×1 瓶

    2

    酶標(biāo)試劑

    6ml×1 瓶

    8

    標(biāo)準(zhǔn)品(240 pmol/L)

    0.5ml×1 瓶

    3

    酶標(biāo)包被板

    12 孔×8 條

    9

    標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    1.5ml×1 瓶

    4

    樣品稀釋液

    6ml×1 瓶

    10

    說明書

    1 份

    5

    顯色劑A 液

    6ml×1 瓶

    11

    封板膜

    2 張

    6

    顯色劑 B 液

    6ml×1/瓶

    12

    密封袋

    1 個

     

    四、操作步驟

    1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

    5號標(biāo)準(zhǔn)品

    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    4號標(biāo)準(zhǔn)品

    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    3號標(biāo)準(zhǔn)品

    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    2號標(biāo)準(zhǔn)品

    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    1號標(biāo)準(zhǔn)品

    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

     

    2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

    3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

    4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

    6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

    7.溫育:操作同3。

    8.洗滌:操作同5。

    9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

    10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

    11.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

    五、試劑盒計算

    以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的

    OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計算出標(biāo)

    準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),

    即為樣品的實際濃度。

     

    六、注意事項

    1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未

    用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

    2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

    3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間

    控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

    4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值

    大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計

    算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    6.底物請避光保存。

    7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

    9.本試劑不同批號組分不得混用。

     

    七.特別提醒

    1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能

    馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

    2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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