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    兔白脂素(Asprosin)檢測試劑盒需要注意的細節問題

     更新時間:2019-10-23 點擊量:1012

    兔白脂素(Asprosin)檢測試劑盒需要注意的細節問題

     

    首先需要注意樣本處理細節,下面是各種樣本具體處理時的細節。

    1.  血清將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20或-80保存,但應避免反復凍融。
    2.  血漿用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20或-80保存,但應避免反復凍融。
    3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

    4.  細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

    注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

     

     

    兔白脂素(Asprosin)檢測試劑盒在操作的時候還有哪些需要注意的地方呢?

    1.嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

    2.洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

    3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

    4.底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。

    5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

    6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。

    7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

    8.任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

    9.不能使用過期產品。

    10.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置

    11.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。

    20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

     

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